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15个月抗TNF-α治疗对类风湿性关节炎患者血浆糖胺聚糖水平的影响

学术文章|来源:BMC|作者:安娜Szeremeta,Agnieszka Ju... 评论(0)

关键词

  • 类风湿关节炎
  • 肿瘤坏死因子-α抑制剂
  • 糖胺聚糖
  • 硫酸角质素
  • 透明质酸

背景

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性,系统性,自身免疫性结缔组织疾病,其特征在于对称关节的非特异性关节炎,以及进行性关节软骨退化和骨侵蚀[ 1 ]。在疾病过程中,存在许多关节外器官表现,这是快速增长的患者残疾的主要原因。与一般人群相比,RA与较高的死亡率相关。RA在任何年龄都影响着世界人口的约0.5-1.5%。40-50岁年龄组和女性中的发病高峰从RA遭受比男性将近两倍或三倍更频繁[ 2,3,4 ]。

尽管许多研究中,RA的原因现在还没有完全已知[ 3,4,5 ]。肿瘤坏死因子α(TNF-α)是主要的促炎细胞因子之一,在该病的发病机制中起关键作用。它已经显示,TNF-α刺激的软骨组织和关节周围的结构的分解代谢过程和显著影响炎症的诱导和持久性[ 4,5,6,7 ]。慢性炎症的一些不可或缺的成分是细胞外基质(ECM)化合物的结构和功能变化,包括蛋白多糖(PGs)及其糖成分 - 即糖胺聚糖(GAGs)[ 8],9 ]。后者是带负电荷的无支链多糖,由重复的己糖胺和糖醛酸或半乳糖的二糖单元组成。软骨素/硫酸皮肤素(CS / DS),硫酸乙酰肝素/肝素(HS / H),硫酸角质素(KS)和透明质酸(HA)代表GAG的主要种类。所有GAG类型,除了HA,共价连接到核心蛋白,前列腺素形成,并且表现出不同程度的硫酸化沿着多糖链[ 10,11,12]。这种结构异质性允许GAG与许多细胞粘附分子,生长因子,细胞因子,趋化因子,ECM组分,蛋白酶及其抑制剂相互作用并改变它们的作用,这些作为其重要的生物学功能的基础,包括细胞通讯,细胞信号传导,和其它生化途径的调节[ 10,13 ]。因此,GAG代谢的每一次修饰都可能在RA发病机制中起关键作用。由于RA期间的慢性炎症,PGs / GAG的生物合成和降解之间的不平衡应该反映在血浆GAG的浓度中。弗里曼等人。[ 14]表明,在患有活动性,侵蚀性RA的患者中,与对照相比,总血浆GAG含量没有差异。另一方面,Jura-Półtorak等人。[ 15 ]描述了RA患者的总血浆GAG水平的增加。

引入中和TNF-α活性的生物药物是RA治疗的突破。临床试验的结果显示在生命和身体功能的与TNF-α抑制剂(TNFαI)治疗的RA患者的质量显著降低疾病活动和放射性进展的抑制的,以及改善16,17,18 ]。然而,抗TNF治疗对RA中PG / GAG代谢的影响仍然未知。因此,本研究的主要目的是在抗TNF-α治疗15个月之前和期间对女性RA患者的总血浆硫酸化和非硫酸化GAG进行定量评估。

方法

患者和样本

四五女性患者(平均±SD年龄47.42±13.70年)符合1987年修订的标准和风湿病2010年美国学会(ACR)/欧洲抗风湿病联盟(EULAR)的诊断标准为RA [ 19,20]被招募参加这项研究。尽管在试验进入时应用至少两种改善疾病的抗风湿药物,但所有受试者的疾病活动性评分为28个关节(DAS28)> 5.1。排除标准包括先前使用生物制剂治疗,在研究期间退出生物治疗,存在疾病(其他自身免疫疾病,感染,心力衰竭,糖尿病,甲状腺疾病,肾脏和肝脏疾病或恶性肿瘤),怀孕和哺乳。此外,所有女性RA患者都参加了使用TNF阻滞剂的波兰国家健康基金治疗计划 - 即B.33:“治疗侵袭性类风湿性关节炎(RA)和青少年特发性关节炎(JIA)”(03.0000.333.02) ),或B.45:“治疗侵袭性类风湿性关节炎(03.0000.345。02)“ - 在2012 - 2014年期间有效。22名患者每隔一周皮下注射阿达木单抗40 mg,19名患者每周一次皮下注射自组织依那西普50 mg,4名患者在第0周,第2周和第4周皮下注射certolizumab pegol 400 mg,然后每人200 mg此后2周,为期15个月。患者继续目前的抗风湿治疗,包括甲氨蝶呤(25毫克/周)和泼尼松(≤7.5毫克/天)。所有受试者均以5mg /天的剂量给予叶酸。在研究期间,伴随药物保持不变。患者的基线特征列于表中 22名患者每隔一周皮下注射阿达木单抗40 mg,19名患者每周一次皮下注射自组织依那西普50 mg,4名患者在第0周,第2周和第4周皮下注射certolizumab pegol 400 mg,然后每人200 mg此后2周,为期15个月。患者继续目前的抗风湿治疗,包括甲氨蝶呤(25毫克/周)和泼尼松(≤7.5毫克/天)。所有受试者均以5mg /天的剂量给予叶酸。在研究期间,伴随药物保持不变。患者的基线特征列于表中 22名患者每隔一周皮下注射阿达木单抗40 mg,19名患者每周一次皮下注射自组织依那西普50 mg,4名患者在第0周,第2周和第4周皮下注射certolizumab pegol 400 mg,然后每人200 mg此后2周,为期15个月。患者继续目前的抗风湿治疗,包括甲氨蝶呤(25毫克/周)和泼尼松(≤7.5毫克/天)。所有受试者均以5mg /天的剂量给予叶酸。在研究期间,伴随药物保持不变。患者的基线特征列于表中 患者继续目前的抗风湿治疗,包括甲氨蝶呤(25毫克/周)和泼尼松(≤7.5毫克/天)。所有受试者均以5mg /天的剂量给予叶酸。在研究期间,伴随药物保持不变。患者的基线特征列于表中 患者继续目前的抗风湿治疗,包括甲氨蝶呤(25毫克/周)和泼尼松(≤7.5毫克/天)。所有受试者均以5mg /天的剂量给予叶酸。在研究期间,伴随药物保持不变。患者的基线特征列于表中 1。

表格1TNFαI治疗女性RA患者的基线特征

15个月抗TNF-α治疗对类风湿性关节炎患者血浆糖胺聚糖水平的影响

抗CCP抗环瓜氨酸肽抗体,BMI体重指数,CRP C反应蛋白,基于28个关节评估的DAS28疾病活动评分,ESR红细胞沉降率,IQR四分位范围,RA类风湿性关节炎,RF类风湿因子,SD标准偏差,SJC28关节肿胀关节数28个,TJC28关节计数28关节,TNFαI肿瘤坏死因子-α抑制剂,VAS视觉模拟量表

在研究的基线和使用DAS28指标开始抗TNF-α治疗后3,9和15个月评估TNFαI治疗的有效性,该指标基于28个肿胀和触痛关节的数量计算。包括关节,红细胞沉降率(ESR),以及患者对100 mm视觉模拟评分(VAS)的疾病活动的全面评估。此外,在每次就诊时,患者接受实验室测试,例如全血细胞计数,炎症标志物,包括ESR和C-反应蛋白(CRP),肌酸酐和肝酶。表2总结了15个月TNFαI治疗期间临床特征的变化 。没有经历足够治疗反应的患者被排除在研究之外。根据波兰国家健康基金治疗计划的原则,适当的治疗反应被定义为在用TNF-α抑制剂治疗的前3个月后DAS28减少> 1.2,并且在随后的体检中记录的DAS28进一步减少1.2。在施用第一剂TNFαI后9和15个月进行。

表2 在15个月的抗TNF-α治疗期间,生化,临床和功能测量的时间变化

15个月抗TNF-α治疗对类风湿性关节炎患者血浆糖胺聚糖水平的影响


通过应用Bonferroni校正,所有变量(DAS28 ESR除外)的差异在p <0.0083时被认为是显着的。注意到DAS28 ESR的差异在p  <0.001时被认为是显着的

抗CCP抗环瓜氨酸肽抗体,BMI体重指数,CRP C反应蛋白,基于28个关节评估的DAS28疾病活动评分,ESR红细胞沉降率,IQR四分位范围,RA类风湿性关节炎,RF类风湿因子,SD标准偏差,SJC28关节肿胀关节数28个,TJC28关节计数28关节,TNF-α肿瘤坏死因子α,TNFαI肿瘤坏死因子-α抑制剂,VAS视觉模拟量表

与T 0相比具有统计学显着性差异

b与T 1相比具有统计学显着性差异

c与T 2相比具有统计学显着性差异

d与T 3相比具有统计学显着性差异

来自波兰卡托维兹的西里西亚医科大学的20名年龄匹配的健康女性志愿者作为对照进行了调查。在获得病史,临床检查和实验室筛查后选择受试者。参加本研究的所有志愿者都没有任何需要住院的疾病,并且在过去的3年中没有接受过外科手术。此外,他们的常规实验室检查结果(即全血细胞计数,ESR,空腹血糖,空腹血脂,肌酐,肝酶,类风湿因子(RF)和CRP)均在参考范围内。如果他们服用甾体或非甾体类抗炎药,则排除受试者。没有志愿者吸烟或有任何吸毒或酗酒史。2。

在收集血浆的当天,在该程序之前,患者会见风湿病学家进行临床访问,在此期间评估患者,疾病的物理视觉模拟评分(VAS),28个关节的触痛计数(TJC28), 28个关节肿胀的关节数(SJC28)和DAS28制成。在禁食过夜后的7.00和9.00之间抽取静脉血样,并收集到经柠檬酸盐处理(提取和测定血浆GAG)和肝素处理(血浆KS和HA水平的测量)管中。将从健康受试者和RA患者获得的血浆样品分离并储存在-80℃直至分析时。

在整个调查期间,我们遵循了1983年修订的赫尔辛基宣言的指导方针和规定。卡托维兹西里西亚医科大学伦理委员会批准了本研究中使用的研究方案。所有健康志愿者和RA患者均提供书面知情同意书。

总血浆GAG水平的提取和测定

使用Lu等人的方法分离硫酸化的GAG。[ 21 ]和Capobianco等人。[ 22 ]。首先,将血浆样品(1ml)在37℃下用Benzonase(E1014; Sigma)预处理24小时以除去核酸。接下来,将血浆样品用灰色链霉菌Streptomyces griseus)蛋白酶(P0652; Sigma)进行彻底消化,以从血浆PG核心蛋白释放GAG链。该蛋白水解在含有4mM CaCl 2的 20mM Tris-HCl(pH9.0)中于56℃进行24小时。孵育后,将样品以19,000× g离心保持30分钟,用相同的缓冲液洗涤沉淀两次。将合并的上清液应用于用20mM Tris-HCl(pH 8.6)缓冲的0.1M NaCl平衡的DEAE-Sephacel柱,并用相同的缓冲液洗涤柱。用2M LiCl在20mM Tris-HCl(pH8.6)中洗脱GAG。随后,将GAG在4℃下彻底透析水24小时并在进一步分析之前冻干。

通过Volpi等人的咔唑方法将GAG的总量定量为己糖醛酸。[ 23 ]和Filisetti-Cozzi和Carpita [ 24 ]以及van den Hoogen等人。[ 25]。然后,向含有GAG水溶液的每个样品中加入4.0M氨基磺酸铵。通过在100℃下加热样品,在含有0.025M四硼酸钠的浓硫酸(95%)中将GAG水解成其单糖组分,同时将葡糖醛酸和/或艾杜糖醛酸残基转化为相应的呋喃衍生物。持续10分钟 然后将管的内容物在冰浴中冷却,并用酶标仪(Infinite M200; Tecan)在525nm处测量样品的背景吸光度。在下一阶段,将测试样品中存在的呋喃衍生物与溶解在无水乙醇中的0.125%咔唑偶联。将管加热至100℃保持15分钟并使其冷却至环境温度。之后,再次在525nm处读取粉红色样品的吸光度。对于己糖醛酸定量,使用以下方法构建校准曲线d - (+)葡糖醛酸内酯标准系列(0-70μg/ ml)。从第二吸光度读数中减去背景吸光度,并从相应的参考曲线内插己糖醛酸浓度。对于葡糖醛酸,反应的灵敏度约为1.5μg。所有样品的测试在1天内完成,因此测量间的变化不显着。总GAG的测定内变异性小于3%。

测量KS和HA血浆水平

使用来自BlueGene Biotech(中国上海)的酶联免疫吸附测定(ELISA),根据制造商的说明,一式两份测量血浆样品中的KS水平。最小可检测的KS水平为0.1ng / ml。所有样品在1天内进行测试,因此测量间的变化不显着。KS水平的测定内变异<10%。

根据制造商的说明,使用TECOmedical Group(Sissach,Switzerland)提供的TECO®透明质酸Plus测试试剂盒,一式两份测定HA的血浆浓度。该ELISA使用高度特异性的透明质酸结合蛋白(HABP)来捕获HA和酶偶联形式的HABP,以检测和测量从血浆样品中捕获的HA。简言之,用样品稀释剂将所有血浆样品稀释50倍。分析灵敏度为2.7 ng / ml。所有样品的测试在1天内完成,以消除测量间变异的影响。测定内变异系数<2.9%。

统计分析

使用STATISTICA版本12(https://www.statsoft.pl)进行数据分析。使用Shapiro-Wilk测试验证了分布的正态性。在分析之前,对未正常分布的数据进行对数转换。变量总结为平均值(SD)(正态分布)或中位数和四分位数(第25-75百分位数)范围(异常分布)。使用Levene检验评估方差的同质性。使用重复测量方差分析(RM-ANOVA)(正态分布数据)评估数据,使用Mauchly的球形测试检查球形度,或使用RM-ANOVA Friedman检验(非正态数据)。在亚组之间存在显着差异的情况下,事后分析基于Tukey检验(p<0.05)或Mann-Whitney U检验(应用Bonferroni校正后获得的p值,p<0.05;六种可能的比较)。

结果

临床反应

在招募用于该研究的总共45名女性RA患者中,排除了16名患者,并且剩余的29名患者完成了用TNFαI治疗15个月。在排除的患者中,由于以下原因中断TNFαI:两名患者无反应,三名患者无反应,三名患者不耐受,四名患者进行外科手术,四名患者停止参与治疗。总体而言,在我们的分析中包括了持续TNFαI治疗15个月的29名女性RA患者,并且在本研究中呈现。

在用TNFαI治疗期间,观察到所有RA患者的显着临床改善。在3个月的过程中,29名患者(100%)根据EULAR反应标准认定为良好反应者[ 26 ]。更重要的是,这种效果持续到第15个月。在第9个月,38%的患者发生RA缓解,在治疗的第15个月发生80%,而其余患者的活动率较低。与基线相比,在TNFαI治疗开始后3,9和15个月,DAS28评分显着降低。此外,治疗9个月和15个月后CRP和ESR水平显着下降(表  2)。

总GAG,KS和HA的血浆水平

关于评估血浆糖胺聚糖(总GAG,KS和HA)的结果仅在完成整个15个月TNFαI治疗的女性RA患者中进行分析(n  = 29)。

用TNFαI治疗前和健康个体中女性RA患者的总血浆GAGs,KS和HA的浓度如图  1a-c所示。在抗TNF-α治疗之前,RA女性中的总GAG和HA水平显着高于健康受试者(均p  <0.001;图  1a,c)。与对照组相比,生物治疗前RA女性的KS水平没有差异(p  = 0.862;图  1b)。

15个月抗TNF-α治疗对类风湿性关节炎患者血浆糖胺聚糖水平的影响


图1 在抗TNF-α治疗前和健康受试者(n  = 20)中RA患者(n = 29)中(a)GAG,(b)KS和(c)HA的血浆水平。使用Mann-Whitney U检验分析数据。一个p  <0.001,与健康受试者相比。GAG糖胺聚糖,HA透明质酸,KS硫酸角质素,最大最大值,最小最小值,RA类风湿性关节炎

在TNFαI治疗开始后3个月,在RA患者中观察到总GAG水平的统计学显着降低(p  <0.001;图  2a)。继续治疗导致进一步下降(p  <0.001;图  2a),达到治疗15个月后年龄匹配的健康对照特征的总GAG水平(p  = 0.183;图  3a)。类似地,响应于抗TNF-α疗法,HA水平显着降低(p  <0.001;图  2c)。此外,抗TNF-α治疗还导致RA患者的HA正常化(p  = 0.826;图  3c)。相反,RA女性的KS水平不受治疗的影响(p  = 0.744;图  2b),并且在TNFαI治疗15个月后与健康受试者的KS水平没有显着差异(p  = 0.788;图  3b)。

15个月抗TNF-α治疗对类风湿性关节炎患者血浆糖胺聚糖水平的影响

图2血浆的时间过程(a)GAG,(b)KS和(c  )在15个月的抗TNF-α治疗期间RA患者(n = 29)中的HA水平。结果表示为平均值(SD)。使用单向RM-ANOVA分析数据,然后进行Tukey的多重比较测试。一个p  <0.001,相对于基线(T 0); b p  <0.001,与治疗后3个月相比(T 1); c p  <0.001,与治疗后9个月相比(T 2); d p  <0.001,与治疗后15个月相比(T 3)。GAG糖胺聚糖,HA透明质酸,KS硫酸角质素,RM-ANOVA重复测量方差分析

15个月抗TNF-α治疗对类风湿性关节炎患者血浆糖胺聚糖水平的影响

图3 抗TNF-α治疗后和健康受试者(n  = 20)中RA患者(n = 29)中(a)GAG,(b)KS和(c)HA的血浆水平。使用Mann-Whitney U检验分析数据。GAG糖胺聚糖,HA透明质酸,KS硫酸角质素,最大最大值,最小最小值,RA类风湿性关节炎


讨论

TNF-α抑制剂为RA的治疗提供了新的标准。TNFαI给药15个月导致疾病活动方面的改善,如所有RA患者中DAS28和CRP的减少以及完全缓解或低疾病活动的实现所示。我们还表明,这种有益效果与ECM组分代谢的改善有关,通过女性RA患者的血浆硫酸化和非硫酸化GAG水平评估。实际上,在抗TNF-α处理下观察到总GAG的降低以及HA水平向正常值的降低。只有RA女性的血浆KS浓度不受治疗的影响。据我们所知,这是第一项研究报告了抗TNF治疗的良好临床反应与RA患者血浆GAG之间的关联。在生物治疗期间在女性RA患者中观察到的血浆GAG水平的定量变化似乎是由于对关键的促炎细胞因子TNF-α的有效抑制,而不是由TNFαI对组织ECM重塑的直接影响。这一建议得到了Jura-Półtorak等人的研究结果的支持。[[15 ],他们评估了用常规合成疾病改善抗风湿药物(即甲氨蝶呤或柳氮磺胺吡啶)治疗的RA患者的疾病活动相关的血浆GAG谱。与我们的结果相似,与疾病活动性低的患者(DAS28≤3.2)相比,他们证实了具有高疾病活性的RA患者(DAS28> 5.1)的总血浆GAG水平显着增加[ 15 ]。因此,RA患者组织PG / GAG周转的主要决定因素不是用于治疗RA的药物类型,而是疾病活动的控制。此外,与我们的结果一致,Jura-Półtorak等人。[ 15]发现与健康个体相比,具有高疾病活性的RA患者的GAG血浆水平显着升高。相反,弗里曼等人。[ 14 ]表明,患有活动性糜烂性RA的女性患者和健康受试者的血浆GAG浓度相似。这些差异可能源于方法上的差异,特别是对于离子交换色谱中使用的床的结合性质,这对于等离子体GAG的分离是至关重要的,其特征在于其电荷的巨大异质性。此外,我们的结果与Friman等人的结果之间存在上述差异。[ 14也可能是由于女性RA患者的疾病活动差异,疾病持续时间以及使用的抗风湿药物类型引起的。总之,我们观察到的RA过程中总GAG的血液积聚可能表明组织ECM转换增加,这取决于疾病活动。

考虑到我们的结果,我们可以假设在TNFαI治疗的15个月期间总血浆GAG水平降低可能是由于酶促和非酶分解代谢过程的减少。基质金属蛋白酶(MMPs)和蛋白家族称为整合素和金属蛋白酶具有血小板反应蛋白基序(ADAMTS),以及活性氧簇(ROS),参与组织的PG /糖胺聚糖[周转9,27,28,29 ]。对于在RA患者的血清前面讨论的酶,MMP-3和MMP-1的水平被认为由TNFαI疗法[待下调30,31,32,33]。关于TNF-α抑制剂对RA患者的ADAMTS活性的影响知之甚少。然而,通过许多临床试验已经广泛记录了TNFαI对放射学进展的抑制作用,可以认为这种有益结果至少部分与聚集蛋白聚糖酶-1(ADAMTS-4)和聚集蛋白聚糖酶-2(ADAMTS-)的活性降低有关。 5),蛋白酶负责主要软骨基质PG的裂解,聚集蛋白聚糖[ 28,34]。RA女性血浆GAG水平改变的另一种机制可能与TNFαI通过抑制核因子-κB(NF-κB)激活促进程序性细胞死亡的能力有关。如先前报道,依那西普以及英夫利昔单抗诱导滑液的单核细胞/巨噬细胞,它们是基质金属蛋白酶和ADAMTS [恒定源的细胞凋亡28,35 ]。此外,TNF-α阻断使RA患者中循环单核细胞的数量正常化[ 36 ]。

除了ECM的蛋白水解分解外,氧化损伤在基质成分的合成后修饰中起着非常突出的作用[ 29 ]。它公知的是过度ROS形成在RA患者导致PG的核心蛋白的过氧化以及GAG链的部分断裂,从而增加了等离子体GAG含量[ 29,37]。因此,似乎在我们的研究中发现的RA女性中总血浆GAG水平的正常化应该部分地反映了这些聚糖的非酶促自由基降解。实际上,已经显示抗TNF-α疗法抑制RA患者中的ROS产生。据报道,TNF-α阻断药物可降低活性氧代谢物(ROM)的血清水平以及氧应激标志物的血清或尿液水平,包括戊糖苷,8-羟基-2'-右旋糖苷(8-OHdG)和ε -己酰基赖氨酸(N ε -HEL)[ 38,39,40 ]。还描述了RA患者开始抗TNF-α治疗后抑制中性粒细胞迁移到炎症关节[ 41]]。提到的细胞在RA滑液中含量丰富,它们释放的氧自由基和其他炎症介质可能会加剧PGs / GAGs的分解代谢[ 41 ]。

由于大多数GAG类型也在非软骨组织中大量存在,因此它们的血浆水平基本上不反映RA患者的软骨PG分解代谢活性[ 42 ]。硫酸角质素是一个例外,其中95%以上的KS存在于聚集蛋白聚糖中,聚集蛋白聚糖是透明,弹性和纤维软骨的大聚集体[ 42 ]。因此,这可能表明大多数血浆KS应来自软骨PG降解。等离子体KS升高水平的骨关节炎患者中观察到,以及在健康个体特征在于较高的运动活动[ 43,44 ]。在之前的研究中,RA患者的血浆KS浓度已显示出增加或减少[ 15,45,46,47 ]。在本研究中,女性RA患者和对照组之间的血浆KS水平没有显着差异。我们还显示,在抗TNF-α治疗的15个月期间,RA女性的KS水平保持不变。我们的研究结果与Niki等人的研究结果不同。[ 30],证实英夫利昔单抗治疗引发的血清KS水平升高在已建立的RA患者中比在早期RA患者组中更显着。这些差异的可能解释可能与KS测量的方法学差异有关。此外,这些差异可能部分是由于患者性别,疾病活动和习惯性运动量的差异造成的。总之,本文提供的数据表明,需要重新评估血浆抗原KS作为TNFαI治疗期间RA患者软骨结构中发生的代谢过程改变的指标的潜在用途。

与KS相反,非硫酸化GAG透明质酸的血浆水平可能有助于预测RA中抗TNF-α疗法的功效。与年龄匹配的健康个体相比,抗TNF-α治疗前女性RA患者的HA循环水平更高。类似的调查结果已经报告在以前的研究中,没有一个确定的患者[性别15,48,49 ]。此外,TNFαI治疗导致HA水平显着降低,降至健康受试者中观察到的值。该研究的结果与Niki等人的结果一致。[ 30]。他们证实,在早期RA组中,在54周的英夫利昔单抗治疗期间,血清HA水平逐渐降低。而且,Niki等人。[ 30]发现早期RA和DAS28患者的血HA水平与CRP等炎症标志物之间存在强烈的线性相关性。这些结果可能表明HA是伴随RA的炎症过程的积极参与者。在RA患者的体循环和滑液中,揭示了透明质酸(LMW-HA)的低分子量片段的存在。由组织HA解聚产生的这种LMW-HA通过调节toll样受体-4或通过激活NF-κB引发促炎反应。NF-κB允许RA慢性炎症的恶性循环通过刺激几种促炎细胞因子如白细胞介素(IL)-1,IL-6和TNF-α,这反过来诱导改建HA代谢的表达[ 8,9,12,29,50 ]。由于透明质酸在所有GAG类型中最容易在ROS存在下降解,因此可以认为抑制自由基介导的HA片段化可能是生物治疗过程中血浆HA正常化的主要原因。在我们的研究中观察到。

结论

总之,我们的研究结果首次表明,抗TNF-α疗法有助于女性RA患者的临床改善,也对组织PGs / GAG的代谢具有有益作用。RA患者中总GAG和HA的血浆水平的正常化表明ECM重塑平衡的改善,主要是由于PG / GAG分解的减少。我们的观察为解释与抗TNF-α治疗相关的软骨保护作用提供了另外的机制。

缩略语

8羟基脱氧鸟苷: 8-羟基-2'- dexoyguanosine

 ACR: 美国风湿病学会

ADAMTS: 具有血小板反应蛋白基序的解整合素和金属蛋白酶

 BMI: 体重指数

CRP: C-反应蛋白

 CS / DS: 软骨素/硫酸皮肤素

DAS28: 疾病活动评分基于28个关节的评估

 ECM: 细胞外基质

ELISA: 酶联免疫吸附测定

 ESR: 红细胞沉降率

 EULAR: 欧洲风湿病联盟

插科打诨: 糖胺聚糖

 哈: 透明质酸

 HABP: 透明质酸结合蛋白

HS / H: 硫酸乙酰肝素/肝素

 IL: 白细胞介素

 KS: 硫酸角质素

LMW-HA: 透明质酸的低分子量片段

 MMP: 基质金属蛋白酶

NF-κB: 核因子-κB

 Ñ ε -HEL: Ñ ε -己酰基赖氨酸

 PG: 蛋白多糖

RA: 类风湿关节炎

 RF: 类风湿因子

 RM-ANOVA: 重复测量方差分析

只读存储器: 活性氧代谢物

 ROS: 活性氧

 SJC28: 肿胀关节数量为28个关节

TJC28: 28个关节的嫩关节数

 TNF-α: 肿瘤坏死因子α

TNFαI: 肿瘤坏死因子-α抑制剂

 VAS: 视觉模拟量表

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